Plasmide Double Nickase (m) Oxytocin-R: sc-422088-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Oxytocin-R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Oxytocin-R Double Nickase (m) et le plasmide Oxytocin-R Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Oxtr. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Oxytocin-R Antibody (C-4): sc-515809
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Oxytocin-R | sc-422088-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Oxytocin-R | sc-422088-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Oxtr code le récepteur murin de l’ocytocine (Oxytocin-R), un RCPG de classe A qui se couple principalement à Gq/11 pour stimuler la signalisation via la phospholipase C, la mobilisation du Ca²⁺ intracellulaire et des programmes transcriptionnels dépendants de la PKC. L’activation du récepteur engage également les voies MAPK/ERK et associées à PI3K, modulant l’excitabilité neuronale et la plasticité synaptique, ainsi que la contractilité du muscle lisse dans les tissus reproducteurs. Dans le SNC, Oxtr contribue à la reconnaissance sociale, à l’attachement, à la réactivité au stress et au traitement sensoriel grâce à une modulation coordonnée des circuits neuroendocriniens et limbiques. Une signalisation de l’ocytocine dérégulée et des variations d’Oxtr ont été associées à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, ce qui soutient son étude dans des modèles du comportement social et de la biologie liée au stress.
Oxytocin-R Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Oxtr dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Oxtr. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Oxtr. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Oxtr.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.