Plasmide Double Nickase (h) Ox-LDL R-1: sc-402338-NIC

OLR1 code le récepteur 1 des lipoprotéines de basse densité oxydées (Ox‑LDL R‑1), un récepteur scavenger qui médie, à la surface cellulaire, la liaison et l’internalisation des LDL oxydées ainsi que d’autres ligands associés aux dommages. La signalisation d’Ox‑LDL R‑1 favorise l’activation endothéliale et les réponses inflammatoires en mobilisant des voies telles que NF‑κB et MAPK, avec des effets sur la production d’espèces réactives de l’oxygène, l’expression de molécules d’adhérence et le recrutement des leucocytes. Une activité dérégulée d’OLR1 est associée à l’inflammation vasculaire et à des phénotypes de gestion des lipides pertinents pour la biologie de l’athérosclérose, et ce gène est fréquemment étudié dans des modèles de cellules endothéliales, de macrophages et de cellules musculaires lisses. En tant que récepteur sensible au stress, OLR1 offre également un point d’entrée mécanistique pour examiner comment les signaux oxydatifs remodèlent les programmes immunométaboliques et la survie cellulaire dans des conditions pro‑inflammatoires.

Ox-LDL R-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus OLR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de OLR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de OLR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de OLR1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.