Plasmide CRISPR/Cas9 KO OSR1 (h): sc-406034
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- OSR1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique OSR1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: OSR1 Antibody (C-8): sc-376545
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO OSR1 (h) | sc-406034 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
OSR1 (odd-skipped related transcription factor 1) code un facteur de transcription à doigts de zinc qui régule les décisions de destinée cellulaire et la mise en place des tissus au cours du développement embryonnaire. Dans les cellules humaines, OSR1 influence des programmes transcriptionnels liés à la différenciation mésenchymateuse, à l’organogenèse et à l’organisation de la matrice extracellulaire, avec des effets en aval sur des processus tels que les interactions épithélio-mésenchymateuses et la morphogenèse. Une expression dérégulée d’OSR1 a été associée à des anomalies du développement et a été rapportée dans des études de biologie tumorale, où des programmes de différenciation et du stroma altérés contribuent aux phénotypes de la maladie. En tant que protéine nucléaire se liant à l’ADN, OSR1 est couramment étudiée pour son rôle dans la régulation transcriptionnelle et les voies de spécification des lignages.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO OSR1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène OSR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du OSR1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert OSR1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine OSR1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en OSR1 pour l'étude de la signalisation de OSR1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de OSR1 essentiels à la fonction de OSR1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de OSR1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le OSR1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le OSR1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus OSR1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le OSR1 plasmide HDR (h) et le OSR1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie OSR1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles OSR1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.