Plasmide Double Nickase (h) OPG/Osteoprotegerin: sc-400497-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) OPG/Osteoprotegerin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OPG/Osteoprotegerin Double Nickase (h) et le plasmide OPG/Osteoprotegerin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TNFRSF11B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: OPG/Osteoprotegerin Antibody (E-10): sc-390518
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) OPG/Osteoprotegerin | sc-400497-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) OPG/Osteoprotegerin | sc-400497-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF11B code l’ostéoprotégérine (OPG), un récepteur leurre sécrété de la superfamille des récepteurs du TNF qui se lie à RANKL (TNFSF11) et à TRAIL (TNFSF10), modulant ainsi la disponibilité des ligands et la signalisation en aval. En antagonisant les interactions RANK–RANKL, l’OPG régule la différenciation et l’activité des ostéoclastes, en s’intégrant aux sorties des voies NF-κB et MAPK qui contrôlent le remodelage osseux et le dialogue immunitaire. Au-delà de la biologie squelettique, l’OPG est impliquée dans la calcification vasculaire et la signalisation endothélium–muscle lisse, reflétant son rôle à l’interface entre inflammation et homéostasie tissulaire. Une expression dérégulée de TNFRSF11B ou un déséquilibre OPG/RANKL a été associé à des phénotypes de densité osseuse, à des processus ostéolytiques et à des mécanismes de maladies vasculaires calcifiantes pertinents pour la recherche translationnelle.
OPG/Osteoprotegerin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TNFRSF11B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TNFRSF11B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TNFRSF11B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TNFRSF11B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.