Plasmide Double Nickase (m) Olfr988: sc-434380-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Olfr988 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Olfr988 Double Nickase (m) et le plasmide Olfr988 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Olfr988. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Olfr988 | sc-434380-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Olfr988 | sc-434380-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Olfr988 code un récepteur olfactif appartenant à la famille des récepteurs olfactifs (OR) de la souris, une famille de RCPG (GPCR) de classe A principalement impliquée dans la détection chimiosensorielle et la transduction du signal dans les neurones sensoriels olfactifs. Lors de la liaison d’un ligand, les OR se couplent à des voies dépendantes des protéines G qui augmentent l’AMPc et déclenchent l’activation de canaux ioniques en aval, favorisant la dépolarisation neuronale et les réponses évoquées par les odeurs. Au-delà de l’olfaction canonique, une expression ectopique d’OR a été rapportée dans certains tissus périphériques, ce qui a conduit à explorer d’éventuels rôles dans la signalisation cellulaire et la régulation génique spécifique des tissus. Une signalisation RCPG dérégulée et des répertoires de récepteurs sensoriels modifiés sont pertinentes pour les études portant sur les troubles de l’olfaction et, plus largement, sur les processus physiologiques médiés par les RCPG.
Olfr988 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Olfr988 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Olfr988. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Olfr988. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Olfr988.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.