Plasmide Double Nickase (m) OLFM2: sc-434096-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) OLFM2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OLFM2 Double Nickase (m) et le plasmide OLFM2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Olfm2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) OLFM2 | sc-434096-NIC | 20 µg | $410.00 |
Olfm2 code pour l’olfactomédine 2 (OLFM2), une glycoprotéine sécrétée/associée à la matrice extracellulaire (MEC), enrichie dans les tissus neuronaux, qui contribue à l’organisation de la MEC et à la communication cellule–cellule. OLFM2 a été associée à la différenciation neuronale, à la croissance des neurites et à des processus liés aux synapses, via des interactions avec des composants membranaires et matriciels qui influencent l’adhésion et la signalisation. Dans des modèles murins et des études d’association chez l’humain, une activité altérée d’OLFM2 a été reliée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs, notamment à des voies impliquées dans l’intégrité des cellules ganglionnaires rétiniennes et les réponses au stress. Ces caractéristiques font d’Olfm2 une cible utile pour disséquer la régulation, médiée par la MEC, des circuits neuronaux et de la vulnérabilité dans des contextes pertinents pour les maladies.
OLFM2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Olfm2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Olfm2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Olfm2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Olfm2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.