Plasmide Double Nickase (m) OGG1: sc-422012-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) OGG1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OGG1 Double Nickase (m) et le plasmide OGG1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ogg1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) OGG1 | sc-422012-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) OGG1 | sc-422012-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin Ogg1 code OGG1, une glycosylase de l’ADN qui initie la réparation par excision de bases en reconnaissant et en excisant les lésions de 8‑oxoguanine générées par les espèces réactives de l’oxygène. Cette activité empêche des transversions mutagènes G:C→T:A et préserve la stabilité du génome lors de la réplication et de la transcription. OGG1 agit au sein des réseaux de réponse au stress oxydant et coordonne son action avec les enzymes en aval de la BER afin de restaurer l’intégrité de l’ADN. Une activité d’OGG1 altérée a été associée à une augmentation de la charge en dommages oxydatifs de l’ADN et est fréquemment étudiée dans des contextes tels que l’inflammation, le stress métabolique, la neurodégénérescence et des modèles de carcinogenèse.
OGG1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ogg1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ogg1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ogg1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ogg1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.