Plasmide Double Nickase (h) OGG1/2: sc-401130-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) OGG1/2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OGG1/2 Double Nickase (h) et le plasmide OGG1/2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant OGG1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) OGG1/2 | sc-401130-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) OGG1/2 | sc-401130-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OGG1 (8-oxoguanine DNA glycosylase) code une enzyme clé de reconnaissance des lésions dans la voie de réparation par excision de base (BER), qui élimine la 8-oxoguanine mutagène générée par les espèces réactives de l’oxygène et restaure l’intégrité du génome. Les isoformes OGG1/2 contribuent à la réparation des bases oxydées dans l’ADN nucléaire et mitochondrial, en coordination avec les facteurs BER en aval, afin de prévenir les transversions G:C vers T:A et le stress de réplication. En limitant l’accumulation de dommages oxydatifs de l’ADN, OGG1 influence les réponses cellulaires à l’inflammation et au stress métabolique, et une activité ou une expression altérée d’OGG1 a été associée à une charge mutationnelle accrue et à une instabilité génomique dans de multiples contextes pathologiques. Ces caractéristiques font d’OGG1 une cible pertinente pour étudier la biologie du stress oxydatif, les interactions entre voies de réparation de l’ADN et les phénotypes cellulaires induits par les mutations.
OGG1/2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus OGG1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de OGG1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de OGG1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de OGG1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.