Plasmide Double Nickase (h) OGFR: sc-407303-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) OGFR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OGFR Double Nickase (h) et le plasmide OGFR Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant OGFR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) OGFR | sc-407303-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) OGFR | sc-407303-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OGFR (opioid growth factor receptor) est un récepteur nucléocytoplasmique qui se lie au peptide opioïde endogène [Met5]-enképhaline (opioid growth factor) et agit comme un régulateur négatif de la prolifération cellulaire. Via l’axe OGF–OGFR, il module la progression du cycle cellulaire, généralement associée au contrôle de la synthèse de l’ADN et à la régulation des points de contrôle, influençant ainsi l’homéostasie tissulaire et les réponses régénératives. L’expression et la signalisation d’OGFR ont été étudiées dans des contextes de croissance dérégulée, notamment en biologie tumorale et dans des modèles de réparation des plaies, où une altération du frein à la prolifération peut contribuer à des phénotypes pertinents pour la maladie. En tant que régulateur conservé de la prolifération, OGFR offre un point d’entrée mécanistique pour étudier comment la signalisation liée aux opioïdes s’articule avec les voies intracellulaires qui gouvernent le contrôle du cycle cellulaire.
OGFR Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus OGFR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de OGFR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de OGFR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de OGFR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.