Plasmide CRISPR/Cas9 KO Odf1 (h): sc-405840
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Odf1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Odf1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Odf1 Antibody (E-11): sc-390152
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Odf1 (h) | sc-405840 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
ODF1 code la protéine 1 des fibres denses externes (Odf1), un composant structural enrichi dans le testicule des fibres denses externes de la queue du spermatozoïde, qui soutient la stabilité de l’axonème et le recul élastique lors du battement flagellaire. Odf1 participe à la spermiogenèse et à l’assemblage tardif du spermatozoïde, contribuant à l’organisation du cytosquelette et à l’intégrité mécanique de la pièce principale. L’altération de l’architecture de la queue du spermatozoïde dépendante d’ODF1 est associée à une motilité réduite et à des phénotypes d’infertilité masculine, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier les mécanismes de l’asthénozoospermie et des défauts spermatogéniques apparentés. Son profil d’expression restreint et sa fonction spécialisée offrent un modèle ciblé pour l’étude de la régulation, dépendante de la différenciation, des protéines du cytosquelette dans les cellules germinales.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Odf1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ODF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ODF1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ODF1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Odf1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ODF1 pour l'étude de la signalisation de Odf1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de ODF1 essentiels à la fonction de Odf1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ODF1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Odf1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Odf1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ODF1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Odf1 plasmide HDR (h) et le Odf1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ODF1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ODF1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.