Plasmide Double Nickase (h) OCT1: sc-402232-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) OCT1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OCT1 Double Nickase (h) et le plasmide OCT1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC22A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) OCT1 | sc-402232-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) OCT1 | sc-402232-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC22A1 code le transporteur humain de cations organiques 1 (OCT1), un transporteur d’entrée polyspecific principalement localisé à la membrane plasmique, où il médie l’importation, indépendante du sodium, d’amines endogènes et de divers cations xénobiotiques. L’activité d’OCT1 influence la répartition cellulaire des cations organiques et contribue aux processus de transport hépatiques et épithéliaux qui déterminent l’exposition intracellulaire, le couplage métabolique et la détoxification. Des variations de l’expression ou de la séquence de SLC22A1 ont été associées à une fonction de transporteur modifiée et à des différences interindividuelles dans la prise en charge des médicaments, ce qui en fait un gène pertinent pour la pharmacogénomique, la toxicologie et la biologie des transporteurs. En recherche, OCT1 est couramment étudié dans le cadre de la régulation du transport membranaire, de la spécificité des substrats et des voies qui gouvernent l’entrée cellulaire et la clairance.
OCT1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC22A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC22A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC22A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC22A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.