OC-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406357

Visão geral

ONECUT3 codifica o fator de transcrição OC-3, um membro da família onecut caracterizado por um domínio CUT e um domínio homeobox de ligação ao DNA, que coordenam programas de expressão gênica específicos de tecido. O OC-3 contribui para a regulação da diferenciação celular e da especificação de linhagem ao controlar redes transcricionais que moldam estados de desenvolvimento e metabólicos. Na biologia humana, padrões de expressão de ONECUT3 têm sido associados à modulação de circuitos regulatórios gênicos epiteliais e hepáticos e a um controle transcricional mais amplo de vias relacionadas à organogênese. A atividade desregulada de membros da família onecut tem sido estudada no contexto de alterações em diferenciação, proliferação e reprogramação transcricional associada a tumores, apoiando seu uso como um nó para estudos mecanísticos de redes gênicas relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OC-3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ONECUT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ONECUT3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ONECUT3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OC-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ONECUT3 para a investigação da sinalização de OC-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ONECUT3 críticos para a função OC-3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ONECUT3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo OC-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo OC-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ONECUT3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo OC-3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR OC-3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ONECUT3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ONECUT3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.