OC-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432551

概要

Onecut2（OC-2）はマウスのホメオボックス型転写因子であり、発生過程において細胞運命の決定および組織パターニングを統合的に制御し、とりわけ神経新生や臓器分化で重要な役割を担います。OC-2は制御DNAエレメントに結合することで転写プログラムを調節し、増殖・分化・領域アイデンティティを制御する系譜決定ネットワークと交差します。Onecutファミリーの活性は、複数の上皮系および神経系の文脈において、細胞アイデンティティの維持と成熟に寄与します。ONECUT2の発現異常は、いくつかの腫瘍タイプで分化状態の変化や腫瘍性の転写回路と関連づけられており、発生生物学およびがん生物学の研究における機構的ハブとしての有用性を示しています。

OC-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるOnecut2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Onecut2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Onecut2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OC-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OC-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Onecut2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OC-2の機能に不可欠なOnecut2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Onecut2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OC-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびOC-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Onecut2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OC-2 HDRプラスミド（m）および OC-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOnecut2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOnecut2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。