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Nurr1双切口酶质粒(h) | sc-400289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nurr1双切口酶质粒(h2) | sc-400289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NR4A2 编码 Nurr1,这是一种孤儿核受体转录因子,负责调控参与神经元分化、线粒体稳态以及细胞应激反应的基因程序。Nurr1 会与其他核受体及共调控因子协同,组织转录网络,从而调节与多巴胺相关的信号传导、炎症基因表达和细胞存活通路。NR4A2 活性异常与神经免疫信号失衡以及多巴胺能表型维持受损有关,因此是研究神经退行性变与炎症相关神经元功能障碍的一个重要靶点。在人源细胞模型中,对 NR4A2 进行扰动有助于从机制层面研究神经发育与应激适应反应中的转录调控。
Nurr1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NR4A2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NR4A2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NR4A2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NR4A2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。