Plasmide Double Nickase (h) Nup88: sc-404091-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nup88 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nup88 Double Nickase (h) et le plasmide Nup88 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NUP88. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nup88 Antibody (H-7): sc-365868
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nup88 | sc-404091-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Nup88 | sc-404091-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NUP88 code pour Nup88, un composant central de la face cytoplasmique du complexe du pore nucléaire, qui contribue à organiser le transport nucléocytoplasmique via des interactions avec des nucléoporines telles que NUP214 et avec des récepteurs de transport. En régulant le trafic des ARNm et des protéines, Nup88 influence la progression du cycle cellulaire, les réponses au stress et des sorties de signalisation dépendant d’une importation/exportation nucléaire au bon moment, y compris des voies liées au contrôle transcriptionnel. Une expression ou une fonction altérée de NUP88 a été associée à une dérégulation du transport nucléaire et de l’homéostasie cellulaire dans des contextes de biologie du cancer et de maladies du développement. Par conséquent, NUP88 est fréquemment étudié dans les mécanismes reliant l’architecture du pore nucléaire à la protéostase et aux programmes d’expression génique.
Nup88 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NUP88 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NUP88. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NUP88. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NUP88.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.