Plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup153 (h2): sc-403206-KO-2
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Nup153 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Nup153, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nup153 Antibody (R3G1): sc-101544
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup153 (h2) | sc-403206-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
NUP153 code Nup153, une nucléoporine d’échafaudage du complexe du pore nucléaire, localisée au panier nucléaire, et qui contribue à l’organisation du transport nucléocytoplasmique. Nup153 participe à l’import et à l’export nucléaires en coordonnant le trafic dépendant des karyophérines, et interagit également avec la chromatine à la périphérie du noyau pour influencer la régulation des gènes et l’organisation du génome à grande échelle. Par ses rôles dans l’architecture de l’enveloppe nucléaire, la progression du cycle cellulaire et la réassemblage mitotique des pores nucléaires, Nup153 affecte des voies qui gouvernent les programmes transcriptionnels et le traitement des ARN. La dérégulation du transport nucléaire et des composants du complexe du pore, dont NUP153, est associée à l’instabilité du génome et à des signalisations aberrantes observées dans divers contextes pathologiques, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Nup153 (h2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène NUP153 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du NUP153, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert NUP153 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Nup153.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en NUP153 pour l'étude de la signalisation de Nup153, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de NUP153 essentiels à la fonction de Nup153
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de NUP153 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Nup153 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Nup153 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus NUP153. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Nup153 plasmide HDR (h) et le Nup153 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie NUP153 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles NUP153 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.