Plasmide Double Nickase (m) NUDT8: sc-425987-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NUDT8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NUDT8 Double Nickase (m) et le plasmide NUDT8 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nudt8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NUDT8 | sc-425987-NIC | 20 µg | $410.00 |
Nudt8 code pour NUDT8, un membre de la famille des hydrolases Nudix impliqué dans l’assainissement du pool cellulaire de nucléotides en hydrolysant des dérivés de diphosphates nucléotidiques potentiellement mutagènes ou actifs dans la signalisation. En régulant l’abondance de nucléotides oxydés ou non canoniques, NUDT8 peut influencer la fidélité de la réplication de l’ADN, les réponses au stress associées au redox, ainsi que des voies du métabolisme des nucléotides qui s’articulent avec l’homéostasie mitochondriale et peroxysomale. Une assainissement des nucléotides dérégulé est largement pertinent pour l’instabilité génomique et des phénotypes de stress inflammatoire, faisant de Nudt8 une cible utile pour explorer les mécanismes qui couplent l’état métabolique à la susceptibilité aux dommages de l’ADN. Les études de Nudt8 chez la souris peuvent aider à préciser les rôles spécifiques aux tissus des enzymes Nudix dans la gestion du stress oxydatif et le contrôle qualité des acides nucléiques.
NUDT8 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nudt8 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nudt8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nudt8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nudt8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.