Plasmide Double Nickase (h) Nucling: sc-406671-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nucling correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nucling Double Nickase (h) et le plasmide Nucling Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UACA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nucling Antibody (A-5): sc-515005
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nucling | sc-406671-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Nucling | sc-406671-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UACA code Nucling, une protéine nucléaire impliquée dans la régulation de la signalisation apoptotique et des réponses au stress cellulaire, à laquelle on attribue des rôles dans la coordination d’événements nucléaires influençant les décisions de survie cellulaire. Nucling a été associée à la modulation de programmes transcriptionnels liés à NF-κB et à d’autres voies de transduction du signal qui relient des signaux inflammatoires à l’apoptose. Une expression altérée de UACA a été observée dans plusieurs contextes pertinents pour les maladies, notamment le cancer et des affections liées au système immunitaire, où une dérégulation de la mort cellulaire et de la signalisation du stress contribue à la pathogenèse. Ainsi, UACA/Nucling est fréquemment étudié dans les mécanismes d’apoptose induite par le stress, le contrôle transcriptionnel et le dialogue entre voies de signalisation affectant l’homéostasie cellulaire.
Nucling Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UACA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UACA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UACA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UACA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.