Plasmide Double Nickase (h) Nucleoredoxin: sc-413004-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nucleoredoxin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nucleoredoxin Double Nickase (h) et le plasmide Nucleoredoxin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NXN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nucleoredoxin Antibody (E-12): sc-393748
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nucleoredoxin | sc-413004-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **NXN** code la nucléoredoxine, une oxydoréductase de la famille des thioredoxines qui couple l’état rédox cellulaire aux sorties de signalisation en catalysant des modifications rédox réversibles des cystéines sur des protéines cibles. La nucléoredoxine a été associée à la régulation de la signalisation **Wnt/β-caténine** via un contrôle, dépendant du rédox, des interactions de Dishevelled, influençant ainsi des programmes transcriptionnels impliqués dans la prolifération, la différenciation et l’homéostasie tissulaire. Elle contribue également aux réponses au stress oxydant et au contrôle, sensible au rédox, de la fonction des protéines au sein du cytosol et de complexes associés. Une activité de NXN dérégulée et une signalisation rédox altérée ont été étudiées dans des contextes tels que l’inflammation, la neurobiologie, le stress métabolique et le remodelage de voies lié au cancer, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques des réseaux de signalisation régulés par le rédox.
Nucleoredoxin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NXN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NXN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NXN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NXN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.