Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) NQO1: sc-421913-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NQO1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NQO1 Double Nickase (m) et le plasmide NQO1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nqo1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NQO1 Antibody (A180): sc-32793
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NQO1 | sc-421913-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Nqo1** code la NAD(P)H:quinone déshydrogénase 1 (NQO1), une flavoprotéine cytosolique qui catalyse la réduction des quinones à deux électrons afin de limiter la formation de semiquinones et la production d’espèces réactives de l’oxygène. NQO1 est une enzyme de détoxification canonique inductible par l’axe NRF2/KEAP1 et participe au maintien de l’homéostasie redox cellulaire, au métabolisme des xénobiotiques et à la protection contre les dommages aux macromolécules induits par des électrophiles. Par ces activités, elle influence les réponses au stress oxydant, la protéostase et l’adaptation métabolique, ce qui la rend pertinente pour l’étude de l’inflammation, de la sensibilité aux toxiques et des phénotypes associés au stress dans des modèles murins. Les modifications de l’activité de NQO1 sont couramment examinées dans des contextes où un déséquilibre redox et un stress chimique modulent la signalisation et les voies de lésion tissulaire.
NQO1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nqo1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nqo1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nqo1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nqo1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.