Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO NPR-C (m): sc-421949
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- NPR-C Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique NPR-C, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NPR-C Antibody (E-5): sc-515449
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO NPR-C (m) | sc-421949 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin Npr3 code le récepteur C des peptides natriurétiques (NPR-C), un récepteur membranaire qui se lie à l’ANP, au BNP et au CNP afin de réguler leur disponibilité et la signalisation en aval. NPR-C est largement décrit comme un récepteur de clairance qui module la signalisation cGMP induite par les peptides natriurétiques en contrôlant le renouvellement des ligands, influençant ainsi le tonus vasculaire, le remodelage cardiaque, la gestion rénale du sodium et l’homéostasie hydrique. Au-delà de la clairance des peptides, NPR-C a été associé à une signalisation impliquant Gi/l’adénylate cyclase ainsi qu’à l’endocytose médiée par le récepteur dans de nombreux types cellulaires. La dérégulation des voies médiées par NPR-C a été liée à des phénotypes cardiométaboliques et cardiovasculaires, faisant de Npr3 une cible utile pour des études mécanistiques de la régulation de la pression artérielle et du remodelage tissulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO NPR-C (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Npr3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Npr3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Npr3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine NPR-C.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Npr3 pour l'étude de la signalisation de NPR-C, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Npr3 essentiels à la fonction de NPR-C
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Npr3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le NPR-C plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le NPR-C plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Npr3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le NPR-C plasmide HDR (m) et le NPR-C (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Npr3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Npr3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.