Plasmide Double Nickase (h) NOXA1: sc-416586-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NOXA1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NOXA1 Double Nickase (h) et le plasmide NOXA1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NOXA1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NOXA1 Antibody (H-6): sc-398873
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NOXA1 | sc-416586-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NOXA1 | sc-416586-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOXA1 (NADPH oxidase activator 1) code une sous-unité régulatrice qui favorise l’activation du complexe NADPH oxydase NOX1 en facilitant son assemblage avec p22phox et des protéines organisatrices, entraînant ainsi une production contrôlée d’espèces réactives de l’oxygène (ROS). La signalisation ROS dépendante de NOXA1 contribue à des voies sensibles à l’état rédox qui influencent le remodelage du cytosquelette, le trafic vésiculaire et des programmes transcriptionnels liés à la prolifération et aux réponses inflammatoires. En tant que modulateur de la signalisation oxydative, NOXA1 est étudié dans des contextes où les ROS affectent la fonction de barrière épithéliale et la signalisation de l’immunité innée, et où un déséquilibre rédox dérégulé contribue à des phénotypes de stress cellulaire. Une activité modifiée de l’axe NOX1/NOXA1 a été examinée dans des modèles d’inflammation chronique et de signalisation associée aux tumeurs, ce qui soutient sa pertinence pour la recherche mécanistique.
NOXA1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NOXA1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NOXA1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NOXA1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NOXA1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.