Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) Nox5: sc-401223-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Nox5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Nox5 (h) y el plásmido de doble nickasa Nox5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NOX5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Nox5 Anticuerpo (A-3): sc-518114
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Nox5 | sc-401223-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Nox5 | sc-401223-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOX5 codifica Nox5, una NADPH oxidasa activada por calcio que genera especies reactivas de oxígeno (ROS) como intermediarios de señalización en células humanas. Al acoplar la dinámica intracelular de Ca2+ con la producción regulada de superóxido y peróxido de hidrógeno, Nox5 influye en vías sensibles al estado redox, incluidas MAPK y NF-κB, así como en la modulación de canales iónicos y la remodelación del citoesqueleto. Las ROS derivadas de Nox5 contribuyen al control de la proliferación, la migración y las respuestas inflamatorias, y su desregulación se ha implicado en fenotipos asociados al estrés oxidativo relevantes para la biología cardiovascular y metabólica. Su actividad se estudia con frecuencia en el contexto de la señalización endotelial y del músculo liso, la regulación inmunitaria y programas transcripcionales dependientes del estado redox.
Nox5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NOX5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NOX5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NOX5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NOX5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.