Plasmide Double Nickase (h) Nop25: sc-408434-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nop25 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nop25 Double Nickase (h) et le plasmide Nop25 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NOL12. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nop25 Antibody (E-2): sc-374257
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nop25 | sc-408434-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Nop25 | sc-408434-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **NOL12** code la protéine nucléolaire **Nop25**, un facteur conservé impliqué dans le métabolisme de l’ARN et l’homéostasie du nucléole. Nop25 a été associée au traitement et à la maturation de l’ARN ribosomique, ce qui la relie à la biogenèse des ribosomes et à la coordination des réponses au stress nucléolaire. Par ces mécanismes, NOL12 peut influencer la capacité globale de traduction ainsi que des programmes de croissance couplés au cycle cellulaire, qui dépendent d’une production efficace d’ARNr. Une fonction nucléolaire altérée et des voies de traitement de l’ARN dérégulées impliquant NOL12 sont souvent étudiées dans le contexte de troubles prolifératifs et de phénotypes liés au maintien du génome dans des systèmes modèles.
Nop25 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NOL12 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NOL12. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NOL12. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NOL12.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.