Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Nop14 (h): sc-408567
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Nop14 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Nop14, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nop14 Antibody (B-5): sc-398763
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Nop14 (h) | sc-408567 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
NOP14 code Nop14, une protéine nucléolaire nécessaire à la biogenèse des ribosomes et à la maturation de l’ARNr 18S via l’assemblage et le processing de la petite sous-unité ribosomique. Elle participe à la formation des particules pré‑ribosomiques et contribue à l’organisation du nucléole, reliant le traitement de l’ARNr au contrôle de la croissance cellulaire et à la protéostasie. La perturbation de NOP14 peut affecter la capacité de traduction et les réponses de stress nucléolaire, des processus qui recoupent la régulation du cycle cellulaire et les points de contrôle associés à p53. Des programmes de biogenèse ribosomique altérés impliquant NOP14 ont été étudiés dans les troubles prolifératifs et en biologie du cancer, dans le cadre d’une dérégulation plus large du traitement des ARN et des voies de signalisation de la croissance.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Nop14 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène NOP14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du NOP14, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert NOP14 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Nop14.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en NOP14 pour l'étude de la signalisation de Nop14, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de NOP14 essentiels à la fonction de Nop14
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de NOP14 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Nop14 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Nop14 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus NOP14. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Nop14 plasmide HDR (h) et le Nop14 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie NOP14 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles NOP14 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.