Plasmide Double Nickase (h) NOL11: sc-411835-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NOL11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NOL11 Double Nickase (h) et le plasmide NOL11 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NOL11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NOL11 | sc-411835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NOL11 | sc-411835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOL11 code une protéine nucléolaire qui soutient la biogenèse des ribosomes en participant à la transcription du pré‑ARNr et aux premières étapes de maturation nécessaires à la formation de la petite sous-unité. Elle agit au sein de réseaux de régulation nucléolaires liés à l’activité de l’ARN polymérase I, aux modifications de l’ARNr et à l’assemblage des particules pré‑ribosomiques, influençant ainsi la capacité globale de traduction. Une perturbation de NOL11 devrait déclencher des réponses de stress nucléolaire qui interfèrent avec le contrôle du cycle cellulaire et des voies de surveillance du génome telles que la signalisation p53. Comme une biogenèse ribosomique dérégulée est une caractéristique fréquente des troubles prolifératifs et des ribosomopathies, NOL11 est souvent étudié dans des travaux portant sur le contrôle de la croissance, la protéostasie et les programmes transcriptionnels d’adaptation au stress.
NOL11 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NOL11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NOL11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NOL11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NOL11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.