Plasmide Double Nickase (m) NMNAT-1: sc-426032-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NMNAT-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NMNAT-1 Double Nickase (m) et le plasmide NMNAT-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nmnat1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NMNAT-1 | sc-426032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) NMNAT-1 | sc-426032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Nmnat1** code la nicotinamide mononucléotide adénylyltransférase 1 (NMNAT-1), une enzyme nucléaire qui catalyse la dernière étape de la biosynthèse du NAD⁺ à partir du NMN et de l’ATP. En maintenant les réserves nucléaires de NAD⁺, NMNAT-1 contribue à l’homéostasie redox et alimente des processus dépendants du NAD⁺, notamment les réponses aux dommages de l’ADN médiées par les PARP ainsi que les programmes de chromatine et de transcription régulés par les sirtuines. L’activité de Nmnat1 relie l’état métabolique aux voies de maintien du génome, influençant la résistance cellulaire au stress et l’intégrité neuronale. La dérégulation du métabolisme du NAD⁺ dépendant de NMNAT-1 est pertinente pour l’étude de la neurodégénérescence, du maintien des axones et des mécanismes pathologiques associés à la réparation de l’ADN.
NMNAT-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nmnat1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nmnat1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nmnat1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nmnat1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.