NKp44 Lentiviral Activation Particles (h): sc-407295-LAC

Das humane NCR2 kodiert NKp44 (CD336), einen aktivierenden Rezeptor, der selektiv auf aktivierten natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) exprimiert wird und vielfältige Liganden auf gestressten, infizierten oder transformierten Zellen erkennt. Nach Ligandenbindung signalisiert NKp44 über den ITAM-tragenden Adapter DAP12 (TYROBP) und fördert Syk/ZAP70-abhängige Signalkaskaden, die an MAPK- und NF-κB-Programme gekoppelt sind und so Degranulation und Zytokinproduktion regulieren. Die Aktivität von NCR2/NKp44 prägt die angeborene Immunüberwachung an mukosalen Grenzflächen und im Tumormikromilieu und wird häufig in Studien zu Entzündung, Infektion und Krebsimmunbiologie untersucht. Eine dysregulierte NKp44-Signalgebung und veränderte Ligandenverfügbarkeit wurden in mehreren Krankheitskontexten mit einer veränderten Effektorfunktion von NK-Zellen in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistischen Marker von NK-Aktivierungszuständen stützt.

NKp44 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NCR2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

NKp44 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NCR2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen NKp44-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NCR2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.