Date published: 2026-7-27

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NHERF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404885-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • NHERF-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase NHERF-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NHERF-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC9A3R1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NHERF-1 Anticorpo (A-7): sc-271552
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    NHERF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-404885-NIC
    20 µg
    $410.00

    SLC9A3R1 codifica a NHERF-1 (fator regulador 1 do trocador Na+/H+), uma proteína de ancoragem com domínio PDZ que organiza receptores de membrana, transportadores de íons e enzimas de sinalização na membrana plasmática. Ao acoplar alvos como NHE3/SLC9A3, CFTR e complexos associados a GPCR a proteínas ERM e ao citoesqueleto de actina, a NHERF-1 regula o transporte iônico epitelial, a polaridade celular e o tráfego intracelular. A NHERF-1 também se integra a redes de sinalização acionadas por quinases, incluindo PI3K/AKT e MAPK, por meio da montagem de complexos multiproteicos que modulam a responsividade dos receptores e a saída das vias a jusante. A desregulação da ancoragem dependente de NHERF-1 tem sido associada a alterações na homeostase epitelial e em comportamentos de sinalização relevantes para a fisiologia renal e intestinal e para mecanismos estudados na biologia do câncer.

    NHERF-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC9A3R1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC9A3R1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC9A3R1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC9A3R1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.