NFRκB CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-433432

概要

マウスのNfrkbはNFRκBをコードしており、NF-κB関連のクロマチンおよび転写制御に関与する核内因子として、刺激応答性の遺伝子発現プログラムに影響を与え得ます。NFRκBは、転写制御やゲノム安定性の維持を含むDNA依存的なプロセスに関わる核内タンパク質複合体との関連が示されています。炎症およびストレス応答遺伝子の状況依存的な発現を調節することで、Nfrkbは細胞増殖・分化・生存を制御する経路の形成に寄与する可能性があります。NF-κB近傍の制御ネットワークの破綻は、免疫機能異常、炎症性表現型、がんに関連する転写状態の研究において、しばしば注目されています。

NFRκB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNfrkb遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Nfrkb内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Nfrkbのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NFRκBタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NFRκBシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Nfrkb欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NFRκBの機能に不可欠なNfrkbエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Nfrkbゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NFRκB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNFRκB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Nfrkb遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NFRκB HDRプラスミド（m）および NFRκB HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNfrkbホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNfrkb標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。