Plasmide CRISPR/Cas9 KO NFRκB (m): sc-433432
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- NFRκB Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique NFRκB, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NFRκB Antibody (A-12): sc-514977
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO NFRκB (m) | sc-433432 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Nfrkb** code **NFRκB**, un facteur nucléaire associé à la chromatine et à la régulation transcriptionnelle liées à **NF-κB**, capable d’influencer des programmes d’expression génique déclenchés par des stimuli. NFRκB a été associé à des complexes protéiques nucléaires impliqués dans des processus dépendants de l’ADN, notamment le contrôle de la transcription et le maintien de la stabilité du génome. En modulant l’expression, selon le contexte, de gènes inflammatoires et de réponse au stress, **Nfrkb** peut façonner des voies qui gouvernent la prolifération, la différenciation et la survie cellulaires. Le dérèglement des réseaux de régulation adjacents à NF-κB est fréquemment étudié dans le cadre des dysfonctions immunitaires, des phénotypes inflammatoires et d’états transcriptionnels pertinents pour le cancer.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO NFRκB (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Nfrkb dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Nfrkb, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Nfrkb à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine NFRκB.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Nfrkb pour l'étude de la signalisation de NFRκB, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Nfrkb essentiels à la fonction de NFRκB
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Nfrkb pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le NFRκB plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le NFRκB plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Nfrkb. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le NFRκB plasmide HDR (m) et le NFRκB (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Nfrkb pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Nfrkb définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.