Plasmide Double Nickase (h) NFκB p52/p100/NFKB2: sc-400418-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NFκB p52/p100/NFKB2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NFκB p52/p100/NFKB2 Double Nickase (h) et le plasmide NFκB p52/p100/NFKB2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NFKB2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NFκB p52/p100/NFKB2 Antibody (C-5): sc-7386
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NFκB p52/p100/NFKB2 | sc-400418-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NFκB p52/p100/NFKB2 | sc-400418-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFKB2 code le précurseur NFκB p100, qui est maturé en sous-unité p52, un régulateur transcriptionnel central de la voie NF-κB non canonique. Grâce au traitement régulé de p100 en aval de récepteurs tels que BAFFR, CD40 et LTβR, NFKB2 contrôle la maturation des lymphocytes B, l’organogenèse des organes lymphoïdes, la signalisation des cytokines et les programmes de survie. Son activité s’intègre à la signalisation IKKα–NIK, à des dimères contenant RelB, ainsi qu’à des interactions avec les réponses NF-κB canoniques, afin de moduler l’expression génique inflammatoire et immunitaire. Une signalisation NFKB2 dérégulée a été associée à des dysfonctionnements immunitaires et à la biologie des hémopathies malignes d’origine lymphoïde, ce qui en fait une cible fréquente d’études mécanistiques sur la signalisation, le contrôle transcriptionnel et les décisions de destinée cellulaire.
NFκB p52/p100/NFKB2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NFKB2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NFKB2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NFKB2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NFKB2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.