Plasmide Double Nickase (h) NF90: sc-402626-NIC

ILF3 code pour NF90, une protéine se liant à l’ARN double brin qui intervient dans la régulation post‑transcriptionnelle de l’expression génique en modulant la stabilité des ARNm, l’épissage, l’export nucléaire et la traduction, souvent en association avec NF45 et d’autres partenaires ribonucléoprotéiques. NF90 participe aux réponses antivirales innées et aux programmes d’adaptation au stress en influençant les transcrits liés à l’interféron et les voies du métabolisme de l’ARN ; elle peut également affecter le contrôle du cycle cellulaire via la régulation sélective d’ARNm associés à la croissance. Par ses interactions avec les machineries de transcription et de maturation de l’ARN, NF90 contribue à coordonner des programmes d’expression génique liés à la prolifération, à la différenciation et à la signalisation du stress cellulaire. Une dérégulation d’ILF3/NF90 a été associée à une altération de l’homéostasie de l’ARN dans des contextes pertinents pour la biologie tumorale et des phénotypes inflammatoires, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques de la régulation dépendante de l’ARN.

NF90 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ILF3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ILF3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ILF3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ILF3.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.