NF-L CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421882

개요

Nefl은 축삭 세포골격을 이루는 핵심 중간섬유 단백질인 뉴로필라멘트 라이트 폴리펩타이드(NF-L)를 암호화하며, 다른 뉴로필라멘트 소단위들과 함께 중합되어 축삭 세포골격을 형성합니다. NF-L은 미세소관 및 액틴 의존적 수송과 연결되는 필라멘트 네트워크를 조직함으로써 축삭의 굵기(axon caliber), 기계적 안정성, 장거리 수송을 지지합니다. 뉴로필라멘트의 조립과 인산화의 동적 변화는 신경세포의 성숙과 유지에 기여하며, Nefl 기능을 세포골격 재구성과 축삭 무결성을 조절하는 경로들과 연결합니다. 뉴로필라멘트 항상성의 교란은 신경퇴행 및 신경외상 연구 전반에서 중요한 의미를 가지며, NF-L의 양과 조직화 변화는 축삭 스트레스와 퇴행을 반영합니다.

NF-L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nefl 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nefl 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nefl의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NF-L 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NF-L 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nefl 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NF-L 기능에 중요한 Nefl 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nefl 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NF-L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 NF-L CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nefl 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NF-L HDR 플라스미드 (m) 및 NF-L HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nefl 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nefl 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.