Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400677

개요

ELANE는 호중구 탈과립과 NET(호중구 세포외 트랩) 형성 과정에서 분비되는 과립 연관 세린 프로테아제인 호중구 엘라스타아제를 암호화하며, 세포외기질 단백질을 절단하고 미생물 독력 인자를 불활성화합니다. 그 활성은 선천면역 신호전달, 프로테아제–항프로테아제 균형, 그리고 백혈구 모집과 조직 재형성을 좌우하는 염증성 연쇄 반응과 긴밀히 통합되어 조절됩니다. 호중구 엘라스타아제 기능이 조절 이상을 일으키면 기도 및 혈관 미세환경에서 비정상적 단백질 분해와 산화/염증 스트레스에 기여할 수 있으며, ELANE 변이는 골수계 성숙 장애를 동반하는 선천성 호중구감소증 표현형과 연관되어 있습니다. 따라서 ELANE는 호중구 생물학, 숙주–병원체 상호작용, 그리고 과립구 생성(granulopoiesis)과 염증성 조직 손상을 연결하는 기전에 관한 연구에서 널리 다루어집니다.

Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ELANE 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ELANE 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ELANE의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Neutrophil Elastase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Neutrophil Elastase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ELANE 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Neutrophil Elastase 기능에 중요한 ELANE 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ELANE 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ELANE 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Neutrophil Elastase HDR 플라스미드 (h) 및 Neutrophil Elastase HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ELANE 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ELANE 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.