Plasmide Double Nickase (h) neuropilin-2: sc-400650-NIC

NRP2 code la neuropiline-2, un co‑récepteur transmembranaire à passage unique qui se lie aux sémaphorines de classe 3 et à certains ligands de la famille VEGF afin de moduler les signaux de guidage et la signalisation des facteurs de croissance. La neuropiline-2 participe au guidage axonal, à la lymphangiogenèse et au remodelage vasculaire en influençant la formation des complexes récepteurs et des voies en aval telles que les voies PI3K–AKT et MAPK. Dans les compartiments immunitaire et stromal, elle peut influer sur la migration et l’adhérence cellulaires ainsi que sur l’organisation des tissus via des interactions dépendantes du contexte avec les plexines et les VEGFR. Une expression ou une signalisation altérée de NRP2 a été associée à une dérégulation des programmes angiogéniques/lymphatiques et à des phénotypes invasifs dans de multiples contextes pathologiques, ce qui en fait une cible fréquente d’études mécanistiques de la signalisation du microenvironnement.

neuropilin-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NRP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NRP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NRP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NRP2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.