Plasmide Double Nickase (h) Neurophysin I: sc-410922-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Neurophysin I correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Neurophysin I Double Nickase (h) et le plasmide Neurophysin I Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant OXT. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Neurophysin I | sc-410922-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Neurophysin I | sc-410922-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’OXT humain code le prépropeptide de l’ocytocine, qui est transformé en nonapeptide ocytocine ainsi qu’en sa protéine porteuse, la neurophysine I ; ensemble, ils favorisent la maturation du peptide, sa stabilisation et sa sécrétion régulée par le système neurohypophysaire. La signalisation de l’ocytocine mobilise principalement le récepteur de l’ocytocine pour activer une mobilisation du calcium dépendante de Gq/PLCβ et des voies MAPK en aval, influençant les programmes de libération neuroendocriniens ainsi que des réponses contractiles et sécrétoires spécifiques des tissus. Dans le système nerveux, la signalisation liée à OXT contribue à la modulation, au niveau des circuits, des comportements sociaux et des réponses au stress, tandis que ses actions périphériques s’intègrent à la physiologie reproductive et métabolique. La dérégulation des voies ocytocinergiques et du processing du peptide a été étudiée dans des phénotypes neurodéveloppementaux et psychiatriques, ainsi que dans des troubles affectant la fonction hypothalamo-hypophysaire, ce qui fait d’OXT une cible pertinente pour des études mécanistiques de la biologie des neuropeptides.
Neurophysin I Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus OXT dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de OXT. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de OXT. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de OXT.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.