Plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (m): sc-419233
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Neurogenin 2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Neurogenin 2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Neurogenin 2 Antibody (2A8): sc-293430
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (m) | sc-419233 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Neurog2 code le facteur de transcription à domaine hélice-boucle-hélice basique (bHLH) Neurogenin 2, un régulateur majeur de l’engagement dans la lignée neuronale au cours du développement embryonnaire chez la souris. Neurogenin 2 induit des programmes d’expression de gènes proneuraux et coordonne la sortie du cycle cellulaire, la différenciation neuronale et la migration via des réseaux transcriptionnels interagissant avec la signalisation Notch et des facteurs bHLH en aval. Il est essentiel à la spécification de multiples sous-types neuronaux dans le système nerveux central et périphérique en développement, ainsi qu’au contrôle de la temporalité de la neurogenèse. Des dérégulations des programmes dépendants de NEUROG2 ont été impliquées dans des phénotypes neurodéveloppementaux et dans des états de différenciation neuronale altérés, pertinents pour la modélisation des troubles du développement cérébral.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Neurog2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Neurog2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Neurog2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Neurogenin 2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Neurog2 pour l'étude de la signalisation de Neurogenin 2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Neurog2 essentiels à la fonction de Neurogenin 2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Neurog2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Neurogenin 2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Neurogenin 2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Neurog2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Neurogenin 2 plasmide HDR (m) et le Neurogenin 2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Neurog2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Neurog2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.