Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (h): sc-401250
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Neurogenin 2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Neurogenin 2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Neurogenin 2 Antibody (2A8): sc-293430
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (h) | sc-401250 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
NEUROG2 (Neurogenin 2) est un facteur de transcription de type « basic helix-loop-helix » (bHLH) qui agit comme régulateur maître proneural de l’engagement dans la lignée neuronale et de la différenciation au cours du développement neural humain. Il coordonne des programmes d’expression génique contrôlant la sortie du cycle cellulaire, la croissance des neurites et la maturation des identités neuronales excitatrices, en s’intégrant à des réseaux de signalisation du développement tels que l’inhibition latérale médiée par Notch et, plus largement, aux cascades transcriptionnelles neurogéniques. L’activité de NEUROG2 façonne la neurogenèse corticale et médullaire en orientant les décisions de destinée des progéniteurs et le calendrier de la différenciation. Les programmes associés à NEUROG2 lorsqu’ils sont dérégulés sont pertinents pour l’étude de la biologie du neurodéveloppement et des mécanismes à l’origine d’une spécification et d’une maturation neuronales altérées.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène NEUROG2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du NEUROG2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert NEUROG2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Neurogenin 2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en NEUROG2 pour l'étude de la signalisation de Neurogenin 2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de NEUROG2 essentiels à la fonction de Neurogenin 2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de NEUROG2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Neurogenin 2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Neurogenin 2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus NEUROG2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Neurogenin 2 plasmide HDR (h) et le Neurogenin 2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie NEUROG2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles NEUROG2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.