Neurensin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423681

Übersicht

Nrsn1 kodiert Neurensin-1, ein in Neuronen angereichertes, membranassoziiertes Protein, das an endosomalem Transport und der Organisation vesikulärer Kompartimente innerhalb von Neuriten beteiligt ist. Neurensin-1 wird mit Prozessen in Verbindung gebracht, die die synaptische Entwicklung und Aufrechterhaltung unterstützen, einschließlich der Regulation der Sortierung von Fracht und der Dynamik intrazellulärer Membranen, die für die neuronale Konnektivität wichtig sind. Eine veränderte Nrsn1-Expression oder ein veränderter Netzwerkkontext wurde in genetischen Studien an Maus und Mensch mit neuroentwicklungsbedingten und neuropsychiatrischen Phänotypen assoziiert, was seine Relevanz für Schaltkreise unterstreicht, die Verhalten steuern. Als Marker und Modulator des neuronalen Membrantransports ist Neurensin-1 nützlich, um Signalwege zu untersuchen, die die Endosomenfunktion mit synaptischer Struktur und neuronaler Homöostase koppeln.

Das Neurensin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Nrsn1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Nrsn1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Nrsn1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Neurensin-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Nrsn1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Neurensin-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Nrsn1-Exone abzielen, die für die Neurensin-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Nrsn1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Neurensin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Neurensin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Nrsn1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Neurensin-1 HDR-Plasmid (m) und Neurensin-1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Nrsn1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Nrsn1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.