Plasmide Double Nickase (m) netrin-1: sc-421980-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) netrin-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide netrin-1 Double Nickase (m) et le plasmide netrin-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ntn1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) netrin-1 | sc-421980-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Ntn1** code la nétrine-1, un signal de guidage sécrété apparenté aux laminines, qui façonne le guidage axonal, la migration neuronale et la mise en place des tissus au cours du développement. La nétrine-1 transmet ses signaux via des récepteurs tels que **DCC** et des membres de la famille **UNC5** pour réguler la dynamique du cytosquelette, l’adhésion et la motilité directionnelle, et elle peut moduler la survie cellulaire ainsi que des processus associés aux barrières selon le contexte cellulaire. Au-delà du système nerveux, la nétrine-1 contribue à des programmes d’angiogenèse et de trafic des cellules immunitaires, reliant des signaux de guidage extracellulaires à l’organisation du microenvironnement. Une dérégulation de la signalisation **NTN1** a été associée à des altérations du câblage neurodéveloppemental ainsi qu’à des mécanismes pertinents pour l’inflammation et la biologie tumorale, ce qui en fait un nœud utile pour disséquer les voies de signalisation dans des modèles variés.
netrin-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ntn1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ntn1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ntn1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ntn1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.