Plasmide Double Nickase (h) NEIL3: sc-406572-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NEIL3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NEIL3 Double Nickase (h) et le plasmide NEIL3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NEIL3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NEIL3 | sc-406572-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NEIL3 | sc-406572-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEIL3 (endonuclease VIII-like 3) est une ADN glycosylase/lyase AP qui initie la réparation par excision de base en reconnaissant et en éliminant des lésions oxydées de l’ADN, avec une préférence pour les lésions présentes dans l’ADN simple brin ou dans des structures d’ADN associées à la réplication. Elle contribue au maintien du génome pendant la phase S en limitant le stress réplicatif et en favorisant la stabilité de la fourche de réplication, reliant l’activité de NEIL3 à la coordination de la réponse aux dommages de l’ADN et à la progression du cycle cellulaire. La fonction de NEIL3 recoupe des voies impliquées dans la régulation du stress oxydant, la réparation associée à la chromatine et le maintien de l’intégrité génomique dans les cellules prolifératives. Une expression ou une fonction altérée de NEIL3 a été associée à une dérégulation de la capacité de réparation de l’ADN et à des phénotypes d’instabilité génomique, pertinents pour l’étude de la biologie des tumeurs et des dommages oxydatifs liés à la neurodégénérescence.
NEIL3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NEIL3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NEIL3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NEIL3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NEIL3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.