Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NEIL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403778
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NEIL1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NEIL1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NEIL1 Anticorpo (D-1): sc-271164
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NEIL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403778 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NEIL1 (endonuclease VIII-like 1) é uma DNA glicosilase/liase AP que inicia o reparo por excisão de base ao reconhecer e remover lesões oxidativas no DNA, incluindo pirimidinas danificadas, e ao processar sítios abásicos para promover a incisão da fita. Atua em vias de resposta ao estresse oxidativo e de manutenção do genoma, coordenando-se com enzimas subsequentes da BER para restaurar a integridade do DNA durante a replicação e a transcrição. A atividade de NEIL1 influencia o acúmulo de mutações e a estabilidade cromossômica, ligando sua desregulação a mecanismos subjacentes à carcinogênese e a outros distúrbios associados ao dano oxidativo ao DNA. Como fator de reparo nuclear, NEIL1 é frequentemente estudada no contexto do reparo associado à replicação, da estabilidade dos genomas mitocondrial e nuclear e das respostas celulares a espécies reativas de oxigênio.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NEIL1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NEIL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NEIL1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NEIL1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NEIL1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NEIL1 para a investigação da sinalização de NEIL1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NEIL1 críticos para a função NEIL1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NEIL1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NEIL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NEIL1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NEIL1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NEIL1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NEIL1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NEIL1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NEIL1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.