NEDL2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-410607

개요

HECW2는 유비퀴틴에 의존적인 방식으로 핵심 세포 기질을 변형하여 단백질 turnover와 신호전달을 조절하는 HECT형 E3 유비퀴틴 리가아제인 NEDL2를 암호화합니다. NEDL2의 활성은 단백질 항상성(proteostasis)에 기여하며, 조절 단백질의 안정성과 가용성을 좌우함으로써 신경 발달, 시냅스 기능, 스트레스 반응성 전사 프로그램과 연관된 경로에 영향을 미칩니다. HECW2의 기능 장애 또는 조절 이상은 신경발달 관련 표현형과 연관되어 왔으며, 세포주기 조절, 분화, 유전체 무결성에 영향을 줄 수 있는 비정상적 유비퀴틴 신호전달의 맥락에서 연구되고 있습니다. 유비퀴틴 경로 구성요소로서 NEDL2는 기질 인식 메커니즘, E2/E3 네트워크 특이성, 그리고 신호전달 노드에 대한 하위 효과를 규명하는 기전 연구에 중요합니다.

NEDL2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HECW2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HECW2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HECW2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NEDL2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NEDL2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HECW2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NEDL2 기능에 중요한 HECW2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HECW2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NEDL2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NEDL2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HECW2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NEDL2 HDR 플라스미드 (h) 및 NEDL2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HECW2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HECW2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.