Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
NEDD8 Antibody (H-2) Alexa Fluor® 680: sc-373741 AF680. Direct near-infrared western blot analysis of NEDD8 expression in HL-60 (A), BJAB (B), Ramos (C), THP-1 (D) and GA-10 (E) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker MW Tag-Alexa Fluor® 790: sc-516731.
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NEDD8双切口酶质粒(h): sc-417924-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- NEDD8 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- NEDD8双切酶质粒（h）和NEDD8双切酶质粒（h2）编码针对NEDD8的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：NEDD8: sc-373741，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NEDD8双切口酶质粒(h) | sc-417924-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NEDD8双切口酶质粒(h2) | sc-417924-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEDD8 编码一种类泛素修饰因子，可在 NEDD8 化（neddylation）通路中与底物发生共价连接；其中最典型的底物是作为 Cullin–RING 型 E3 泛素连接酶（CRL）骨架的 cullin 家族蛋白。NEDD8 的连接通过调控 CRL 活性以及下游依赖泛素的蛋白质稳态，从而影响蛋白质周转、细胞周期进程、DNA 复制与修复以及应激信号传导。NEDD8 化受到扰动会改变检查点控制、基因组稳定性与转录程序，使 NEDD8 通路失调与多种疾病背景下观察到的增殖表型和信号网络重编程相关联。作为类泛素翻译后修饰的关键枢纽，NEDD8 被广泛用于蛋白质组学研究、通路绘制以及功能基因组学筛选。
NEDD8 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 NEDD8 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NEDD8内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏NEDD8的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了NEDD8基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。