NCS-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404303

개요

NCS1는 신경 칼슘 센서-1(neuronal calcium sensor-1, NCS-1)을 암호화하는 유전자로, 세포 내 칼슘(Ca²⁺) 농도의 일시적 변화를 막과 시냅스에서의 신호 출력으로 변환하는, 보존된 EF-hand Ca²⁺ 결합 단백질이다. NCS-1는 소낭 수송과 엑소사이토시스, 신경돌기(neurite) 성장, 그리고 포스파티딜이노시톨 4-키나아제(phosphatidylinositol 4-kinase) 및 포스포이노시타이드 의존성 경로를 형성하는 신호 복합체 등과의 상호작용을 통해 수용체 및 이온 채널 기능을 조절하는 등 다양한 과정을 조절한다. 인간 세포에서 NCS-1는 칼슘 의존적으로 신경 흥분성과 시냅스 가소성을 조절하는 데 기여하며, 자극에 의해 유발되는 Ca²⁺ 유입을 하위 적응 반응으로 연결한다. NCS-1의 발현 또는 신호전달의 변화는 신경정신질환 및 신경퇴행성 표현형과 관련된 맥락에서 연구되어 왔으며, 칼슘 신호 조절 이상을 기전적으로 연구하는 데 있어 그 중요성을 뒷받침한다.

NCS-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NCS1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NCS1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NCS1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NCS-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NCS-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NCS1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NCS-1 기능에 중요한 NCS1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NCS1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NCS-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NCS-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NCS1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NCS-1 HDR 플라스미드 (h) 및 NCS-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NCS1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NCS1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.