Plásmido Doble Nickase (h) NBR1: sc-402592-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)NBR1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NBR1 (h) y el plásmido de doble nickasa NBR1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NBR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NBR1 Anticuerpo (4BR): sc-130380
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) NBR1 | sc-402592-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) NBR1 | sc-402592-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NBR1 (neighbor of BRCA1 gene 1) codifica un receptor selectivo de autofagia que acopla carga ubiquitinada al autofagosoma a través de su región de interacción con LC3 y sus dominios de unión a ubiquitina. Funciona junto con receptores relacionados como SQSTM1/p62 para mantener la proteostasis, dirigiendo agregados proteicos, orgánulos dañados y partículas invasoras hacia la degradación lisosomal. Mediante sus funciones en la agrefagia y la pexofagia, NBR1 contribuye a las respuestas al estrés celular y se integra con vías que regulan el estrés oxidativo y la señalización inflamatoria. La depuración desregulada de carga dependiente de NBR1 se ha implicado en trastornos caracterizados por una autofagia defectuosa y un control de calidad proteica alterado, incluida la neurodegeneración y la adaptación al estrés asociada al cáncer.
NBR1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NBR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NBR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NBR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NBR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.