Plasmide Double Nickase (m) NALP6: sc-430389-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NALP6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NALP6 Double Nickase (m) et le plasmide NALP6 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nlrp6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NALP6 | sc-430389-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) NALP6 | sc-430389-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Nlrp6** code **NALP6**, un récepteur cytosolique de type NOD (NOD-like) qui agit comme capteur de l’immunité innée et régulateur de la signalisation associée à l’inflammasome. NALP6 influence l’activation de la caspase-1, la maturation des cytokines de la famille de l’IL-1 et les programmes transcriptionnels inflammatoires en aval, reliant la détection des microbes et des signaux de danger aux réponses immunitaires épithéliales et myéloïdes. Dans le tractus gastro-intestinal, **NLRP6** a été impliqué dans le maintien de la fonction de barrière muqueuse et dans le façonnement des interactions hôte–microbiome, avec une pertinence pour des modèles de colite et d’inflammation intestinale. Une activité altérée de NLRP6 a également été étudiée dans le contexte de la susceptibilité aux infections et de l’homéostasie tissulaire pilotée par l’inflammation.
NALP6 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nlrp6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nlrp6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nlrp6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nlrp6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.