Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
N6AMT2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406341
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- N6AMT2 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在N6AMT2基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：N6AMT2: sc-390240，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
N6AMT2 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406341 | 20 µg | $397.00 |
概述
EEF1AKMT1 编码 N6AMT2，这是一种赖氨酸甲基转移酶，可修饰与翻译相关的因子，并通过调节蛋白质合成与共翻译质量控制来维持蛋白稳态（proteostasis）。研究表明，N6AMT2 与核糖体功能调控及更广泛的 RNA 代谢有关，从而将其与细胞生长程序和应激适应性的翻译调控联系起来。翻译机器的甲基化发生改变，可能会重塑营养感知与蛋白毒性应激下游的信号输出，使 EEF1AKMT1 在细胞周期进程、细胞凋亡和代谢适应等研究中具有相关性。在癌症和神经生物学研究背景中，翻译过程及依赖甲基转移酶的调控失衡较为常见，因此支持在不暗示任何临床用途的前提下，进一步探索 N6AMT2 在疾病相关表型中的作用。
N6AMT2 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中EEF1AKMT1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对EEF1AKMT1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏EEF1AKMT1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使N6AMT2蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建EEF1AKMT1缺失的细胞模型，用于N6AMT2信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 N6AMT2 功能至关重要的 EEF1AKMT1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 EEF1AKMT1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 N6AMT2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 N6AMT2 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 EEF1AKMT1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 N6AMT2 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 N6AMT2 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由EEF1AKMT1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定EEF1AKMT1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。