Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Myosin X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402204
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myosin X O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Myosin X, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Myosin X Anticorpo (C-1): sc-166720
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myosin X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402204 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O MYO10 humano codifica a miosina X, um motor não convencional baseado em actina que se localiza nas pontas de filopódios e regula a iniciação, a extensão e o transporte de cargas nos filopódios. A miosina X conecta a remodelação de actina ao tráfego de integrinas e à dinâmica de adesão célula–matriz, sustentando a migração dirigida, o crescimento de neuritos e processos morfogenéticos. Por meio da coordenação com reguladores do citoesqueleto e vias de tráfego de membrana, o MYO10 influencia processos como endocitose, formação de protrusões e responsividade a pistas de orientação. A expressão ou função desregulada de MYO10 tem sido associada a alterações na motilidade celular e no comportamento invasivo em modelos relevantes para doenças, o que o torna útil para estudar mecanismos que acoplam a organização do citoesqueleto à sinalização.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myosin X (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYO10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYO10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYO10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myosin X.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYO10 para a investigação da sinalização de Myosin X, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYO10 críticos para a função Myosin X
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYO10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Myosin X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Myosin X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYO10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Myosin X Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Myosin X (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYO10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYO10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.