非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
肌动蛋白VI抗体（A-9）：sc-393558。Western blot分析K-562（A）和HCT-116（B）细胞裂解液中肌动蛋白VI表达。检测试剂：m-IgGκ BP-HRP：sc-516102。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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Myosin VI CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401815
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Myosin VI CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Myosin VI基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Myosin VI: sc-393558，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Myosin VI CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-401815 | 20 µg | $397.00 |
概述
MYO6 编码人肌球蛋白 VI（myosin VI），这是一种非传统的肌动蛋白依赖性马达蛋白，其独特之处在于沿肌动蛋白丝朝负端方向运动，从而支持细胞内运输与膜动力学过程。肌球蛋白 VI 参与网格蛋白介导的内吞作用、内体分选、高尔基体及分泌途径运输，并参与微绒毛和听毛（stereocilia）等富含肌动蛋白结构的组织与维持。通过与适配蛋白及货物分子相互作用，它促进细胞迁移、黏附和机械感觉相关过程，将细胞骨架重塑与囊泡运输连接起来。MYO6 的失调与听觉相关表型以及上皮组织结构异常有关，因此与感觉生物学研究及细胞骨架驱动的运输缺陷研究密切相关。
Myosin VI CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中MYO6基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对MYO6基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏MYO6开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Myosin VI蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建MYO6缺失的细胞模型，用于Myosin VI信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Myosin VI 功能至关重要的 MYO6 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 MYO6 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Myosin VI CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Myosin VI CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 MYO6 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Myosin VI HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Myosin VI HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由MYO6同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定MYO6靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。